近年來,質(zhì)譜技術(shù)與其他分離分析技術(shù)的聯(lián)用,特別是液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用為中藥樣品及其代謝物的復(fù)雜體系的分離分析提供了有效手段。而質(zhì)譜與其他分析技術(shù)的聯(lián)用還包括紫外光譜、核磁共振、圓二色譜等,不同的分析方法之間信息相互補(bǔ)充,為中藥及其代謝產(chǎn)物的定性定量分析提供了強(qiáng)有力的手段。

代謝物分析

中藥經(jīng)過體內(nèi)代謝后成分變得更加復(fù)雜,有些代謝產(chǎn)物含量較低,給代謝物定性分析帶來了一定困難,而液/氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)不僅可以將代謝物從復(fù)雜的體系中分離,還能夠排除血、尿等基質(zhì)的干擾,實(shí)現(xiàn)微量代謝物的分析。Han等利用UPLC-QTOF/MS研究了龍膽苦苷在人體 內(nèi)的代謝產(chǎn)物。人口服給藥后采集尿液樣品,利用UPLC-QTOF/MS方法鑒定出了尿液中龍膽苦苷的15種代謝產(chǎn)物; 并且結(jié)合核磁共振 (NMR) 和圓二色譜 (ECD) 技術(shù)對(duì)鑒定出的代謝物進(jìn)行立體結(jié)構(gòu)確認(rèn),發(fā)現(xiàn)龍膽苦苷在人體內(nèi)經(jīng)過氧化、環(huán)化、葡醛酸結(jié)合和去糖基化反應(yīng)等一些新穎的代謝轉(zhuǎn)化,結(jié)合相關(guān)活性實(shí)驗(yàn)證明了具有肝臟保護(hù)作用的活性代謝產(chǎn)物— G05和G06,為新藥研發(fā)提供了科學(xué)數(shù)據(jù)的支持。由于中藥的整體調(diào)節(jié)作用,相比單一成分,復(fù)方和中藥提取物的代謝研究也越來越受到關(guān)注。有研究利用液相色譜-高分辨質(zhì)譜分析技術(shù)分別對(duì)復(fù)方丹參片劑及蟾酥的原形成分及血液、尿液中代謝產(chǎn)物進(jìn)行了鑒定分析,為中藥活性組分的篩選及新藥研發(fā)提供了有效的化學(xué)信息。

藥代動(dòng)力學(xué)

中藥成分眾多,其藥理作用往往是多種成分共同作用的效果。因此,中藥的藥代動(dòng)力學(xué)應(yīng)該對(duì)其中的多種成分同時(shí)進(jìn)行研究。研究者應(yīng)用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (LC-MS/MS) 技術(shù)首次建立了兩種相互補(bǔ)充的中藥多成分藥代動(dòng)力學(xué)研究方法,并將低濃度電解質(zhì)效應(yīng)及脈沖梯度洗脫色譜技術(shù)應(yīng)用到藥代動(dòng)力學(xué)研究中,顯著提高了液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)作為中藥多成分體內(nèi)微量分析方法的可測性和可用性。Li等建立了血漿中穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸鹽的LC-MS/MS檢測方法,并用此方法進(jìn)行了人血漿中穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸鹽的藥代動(dòng)力學(xué)研究,該方法大大提高了檢測的靈敏度,加快了分析速度。

超高效液相色譜的出現(xiàn)使樣品分析分離進(jìn)入了一個(gè)新的高度,超高效液相色譜-質(zhì)譜的聯(lián)用也成為了藥物代謝產(chǎn)物分析的最佳選擇。Cheng等應(yīng)用超高效液相色譜/四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜方法快速對(duì)靈芝粗提物在大鼠的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了分離鑒定,每個(gè)樣品分析時(shí)間僅用30 min,在膽汁內(nèi)發(fā)現(xiàn)并鑒定了90種代謝產(chǎn)物。Sun等建立了RRLC-QTOF/MS方法,將高分辨串聯(lián)質(zhì)譜應(yīng)用于人參皂苷Rc及其代謝產(chǎn)物的藥代動(dòng)力學(xué)研究中,并發(fā)現(xiàn)人參皂苷在大鼠體內(nèi)以去糖基化為主要代謝途徑,結(jié)合藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果,有利于更好地了解人參的生物活性。Zhu等利用高靈敏度超快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法 (UFLC-MS/ MS) 考察了中藥復(fù)方梔子大黃湯中2種環(huán)烯醚萜苷、2種蒽醌類和4種黃酮苷類化合物在正常大鼠和膽汁淤積性肝損傷大鼠血液中的藥代動(dòng)力學(xué)特征,通過四級(jí)桿-離子阱串聯(lián)質(zhì)譜 (QTRAP-MS/MS) 中多反應(yīng)離子監(jiān)控模式 (MRM) 實(shí)現(xiàn)了多種化合物的同時(shí)檢測,并通過方法學(xué)的驗(yàn)證證明了該方法的可靠性。